Detekcija latentnog virusa borovnice na američkoj visokožbunastoj borovnici u Srbiji

Abstract

Poslednjih godina američka visokožbunasta borovnica (Vaccinium corymbosum L.) zauzima sve značajnije mesto u gajenju jagodastog voća u Srbiji. Prema procenama, borovnica se danas gaji na preko 2.500 ha sa izraženom tendencijom rasta. Proizvodnju borovnice, pored gljiva i bakterija, mogu ugroziti i brojni fitopatogeni virusi koji u zavisnosti od osetljivosti sorte pričinjavaju manje ili veće štete. Latentni virus borovnice (blueberry latent virus - BlLV, familija Amalgaviridae, rod Amalgavirus) je nedavno otkriveni virus borovnice koji na žbunovima ne izaziva vidljive simptome. U pojedinačnim i mešanim infekcijama sa drugim virusima ne prouzrokuje ekonomske štete. Prisustvo BlLV je za sada potvrđeno samo u SAD i Japanu. U cilju ispitivanja prisustva i rasprostranjenosti BlLV u Srbiji, u periodu od 2012−2020. godine sakupljeno je i analizirano ukupno 78 uzoraka borovnice. Analizirani su uzorci 12 sorti (’Aurora’, ’Barbara Ann’, ’Bluecrop’, ’Bluetta’, ’Duke’, ’Goldtraub’, ’Jolene’, ’Liberty’, ’Patriot’, ’Reka’, ’Spartan’ i ’Sweet Jane’) koji su uzeti iz 15 lokaliteta. Za detekciju BlLV primenjena je metoda reverzne transkripcije i lančane reakcije polimeraze (Reverse Transcription – Polymerase Chain Reaction, RT-PCR). Ekstrakcija ukupnih nukleinskih kiselina iz lišća borovnice urađena je sa 2% CTAB puferom. Reverzna transkripcija urađena je sa pd(N)6 random prajmerima, dok su u PCR reakciji korišćeni BlLV-specifični prajmeri koji umnožavaju 391 bp fragment fuzion protein gena. Dobijeni PCR proizvodi su analizirani elektroforezom u 1,5% agaroznom gelu i bojenjem etidijum-bromidom. Prisustvo BlLV je potvrđeno u svim lokalitetima u 59 ispitivanih uzoraka (74,7%). Virus je detektovan kod svih ispitivanih sorti, osim u uzorcima sorte ’Barbara Ann’. Osim u pojedinačnoj infekciji, prisustvo BlLV je potvrđeno i u 15 uzoraka u mešanoj infekciji sa virusom mozaika borovnice (blueberry mosaic-associated virus) i virusom crvene prstenaste pegavosti borovnice (blueberry red ringspot virus). Identifikacija BlLV je potvrđena sekvencioniranjem umnoženih fragmenata fuzion protein gena odabranih izolata. Latentni virus borovnice se ne smatra ekonomskim značajnim virusom borovnice jer ne izaziva vidljive simptome na zaraženim biljkama. I pored značajnog prisustva BlLV u zasadima borovnice u Srbiji ne bi trebalo očekivati probleme u proizvodnji zbog infekcije ovim virusom.