Micropropagation of Cherry Rootstock Gisela 5

Abstract

The paper presents a protocol for micropropagation of cherry rootstock Gisela 5 (Prunus cerasus x Prunus canescens). The influence of repeated subculturing on proliferation capacity of shoots as well as the effect of type and concentration of plant growth regulators (PGRs) on multiplication and rooting parameters were studied. With standard method of surface sterilization of initial explants, aseptic culture was established on Murashige and Skoog (1962) medium (MS) with 2.0 mg/l BA, 0.5 mg/l IBA and 0.1 mg/l GA3. After leaf rossettes initiation, shoots were multiplied in five successieve subcultures on MS medium containing 1.0 mg/l BA in combination with IBA i GA3 each applied at 0.1 mg/l. Decline in shoot formation capacity over repeated subcultures was observed, so as the highest value of multiplication index (3.2) was noticed in first subculture after initiation. However the subculturing improved the shoot elongation, and the highest value of shoots length, especially in axial shoots (1.32 cm), was observed in fifth subculture. Change in BA concentration in combination with NAA instead of IBA in fifth subculture did not influence multiplication index, as well as most other multiplication parameters. Gisela 5 displayed similar rooting ability on media containing 1.0 mg/l IBA or NAA (65% and 70%, respectively). 1-min dip treatment in NAA dissolved in sterile water (500 mg/l) followed by growing on hormone free (HF) medium significantly decreased rooting rate (50%), while shoots grown just on HF medium did not root at all. The percentage of acclimatization was significantly higher in in vitro rooted (61.8%) than in unrooted shoots (33.3%).

Представен е протокол за микроразмножаване на черешова подложка Гизела 5 (Prunus cerasus x Prunus canescens). Изследвано е влиянието на многократно субкултивиране, върху пролиферационния капацитет на леторастите, както и влиянието на вида и концентрацията на растежни регулатори на растенията (PGRs) върху параметрите на мултипликация и вкореняване. Със стандартен метод за повърхностна стерилизация на първоначалните експланти се установи асептична култура върху Murashige и Skoog (1962) среда (MS) с 2.0 mg/l BAP, 0.5 mg/l IBA и 0.1 mg/l GA3. След инициирането на листни розетки, леторастите се мултиплицират в пет последователнисубкултури върху MS среда, съдържаща 1.0 mg/l BA в комбинация с IBA и GA3, всеки прилаган при 0.1 mg/l. Наблюдава се намаление на капацитета на образуване на леторасти при многократни субкултури, като найвисоката стойност на индекса на мултипликация (3.2) се забелязва в първата субкултура след иницииране то. Въпреки това субкултивирането подобрява удължаването на леторастите, а най-високата стойност на дължината на леторастите, особено при леторасти от аксиларен произход (1.32 cm), се наблюдава в пета субкултура. Промяната в концентрацията на БА в комбинация с NAA вместо IBA в пета субкултура не повлиява индекса на мултипликация, както и повечето други параметри за мултипликация. Гизела 5 показва подобна способност за вкореняване в среда, съдържаща 1.0 mg/l IBA или NAA (съответно 65% и 70%). 1-min потапяне в NAA разтворена в стерилна вода (500 mg/l), последвано от отглеждане върху среда без хормони (HF) значително понижава процента на вкореняване (50%), докато леторасти отглеждани само в HF среда изобщо не се вкореняват.